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乳品中骨橋蛋白測(cè)定方法改進(jìn) 高效液相色譜法解決難題

2022-12-22 09:13:53 來(lái)源：化工儀器網(wǎng) 閱讀量：8885

　　 骨橋蛋白是一種高度磷酸化的酸性糖蛋白，具有較強(qiáng)的鈣結(jié)合特性。初步研究表明，骨橋蛋白可影響嬰兒免疫功能的發(fā)育，促進(jìn)免疫系統(tǒng)的成熟并有效預(yù)防病原性感染。此外骨橋蛋白還被認(rèn)為在大腦發(fā)育中起作用，通過(guò)促進(jìn)髓鞘形成在嬰兒的大腦發(fā)育和行為發(fā)展中發(fā)揮重要作用。
 
　　乳清骨橋蛋白在母乳中的含量很高，而在牛乳中的含量很少。現(xiàn)代乳基嬰幼兒配方食品通常以牛乳為原料，添加骨橋蛋白可以使配方奶粉具有更接近母乳的功能，更符合嬰幼兒的營(yíng)養(yǎng)需求。
 
　　現(xiàn)代父母對(duì)于嬰幼兒食品的要求不僅是質(zhì)量安全，還有對(duì)嬰幼兒成長(zhǎng)發(fā)育的有益影響。因此，強(qiáng)化骨橋蛋白的乳基嬰幼兒配方食品更受市場(chǎng)歡迎。隨之而來(lái)的是嬰幼兒食品和乳品骨橋蛋白含量的檢測(cè)需求。
 
　　目前測(cè)定骨橋蛋白的方法多為酶聯(lián)免疫法(ELISA)。ELISA作為酶免疫測(cè)定技術(shù)中應(yīng)用最廣的技術(shù)，有操作簡(jiǎn)單、特異性和敏感性高等優(yōu)勢(shì)。但目前的ELISA試劑盒主要針對(duì)人乳骨橋蛋白的測(cè)定，而對(duì)于牛乳骨橋蛋白開(kāi)發(fā)的產(chǎn)品較少，準(zhǔn)確度和靈敏度也無(wú)法滿足要求。而且不同的商業(yè)化ELISA 試劑盒測(cè)定的濃度存在差異，這也影響到ELISA在實(shí)驗(yàn)室中的應(yīng)用。
 
　　此外，無(wú)膠篩分毛細(xì)管電泳法(NGSCE)、反相高效液相色譜法(RP-HPLC)和液相色譜法-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)等，也都存在諸多問(wèn)題。如反相液相色譜法具有良好的線性、靈敏度、精密度以及回收率，能夠簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確的測(cè)定嬰幼兒配方奶粉中的OPN，但這種方法可能會(huì)受到其它各種蛋白質(zhì)的干擾。液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)可以提供更大的特異性、速度和分析物范圍，但是成本高，而且產(chǎn)品加工過(guò)程中的美拉德反應(yīng)使得賴氨酸乳糖化修飾、胰酶作用位點(diǎn)失去特異性，導(dǎo)致特異肽段減少，會(huì)對(duì)質(zhì)譜檢測(cè)結(jié)果造成較大干擾，使檢測(cè)出的骨橋蛋白含量偏低。
 
　　為解決乳品中骨橋蛋白的檢測(cè)問(wèn)題，黑龍江飛鶴乳品有限公司、國(guó)家奶業(yè)科技創(chuàng)新聯(lián)盟、中優(yōu)乳奶業(yè)研究院(天津)有限公司、中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所共同創(chuàng)建了創(chuàng)建了高效液相色譜測(cè)定方法，并制定團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《嬰幼兒食品和乳品中骨橋蛋白的測(cè)定 高效液相色譜法》。該標(biāo)準(zhǔn)于近日通過(guò)審定。
 
　　高效液相色譜法選用陰離子交換色譜柱作為分離柱，解決了不同乳制品及嬰幼兒配方乳粉前處理過(guò)程中骨橋蛋白的分離和提取難題。不僅操作簡(jiǎn)單、成本低、普及性高，還能夠解決目前使用最廣泛的ELISA缺少滿足要求的牛乳骨橋蛋白測(cè)定試劑盒的問(wèn)題。
 
　　骨橋蛋白測(cè)定方法的改進(jìn)一方面可以為配方奶粉生產(chǎn)企業(yè)提供更有力的產(chǎn)品工藝研究工具，另一方面也為市場(chǎng)上的強(qiáng)化骨橋蛋白嬰幼兒配方食品的質(zhì)量提供了保障。
 
　　(資料來(lái)源：《中國(guó)食品報(bào)》等)
 

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