PriboFast® 290赭曲霉素多功能凈化柱
玉米,小麥,大麥和稻谷中的應(yīng)用
赭曲霉毒素A(OTA)由曲霉菌屬(Aspergillus) 或青霉菌屬(Penicillium) 的幾種真菌產(chǎn)生。根據(jù)這些真菌的特性,其產(chǎn)毒多發(fā)生在中溫帶和亞熱帶地區(qū),在大多數(shù)農(nóng)作物中都能發(fā)現(xiàn),如谷物,咖啡和葡萄。赭曲霉毒素A被證明對(duì)大多數(shù)動(dòng)物是潛在的腎毒素,研究表明OTA具有致癌性和致畸性。
樣品準(zhǔn)備:
取代表性的二次取樣樣品,用碾磨機(jī)粉碎,要使70%以上的樣品顆粒在1mm以下。稱取25g粉碎后的二次取樣樣品,加12.5ml 0.1M H3PO4 到樣品中, 加125ml 二氯甲烷,混
勻。蓋緊后振蕩30分鐘或高速攪拌2分鐘。用定量濾紙過濾到樣品杯,蓋上蓋。
凈化:
取5ml樣品提取液放入凈化柱中,重力過柱。溶液棄掉。溶液液相到達(dá)填料上層后,分別用5ml正己烷,再用15ml二氯甲烷(3*5ml)清洗柱子,棄去溶液。清洗完畢,凈化柱下連接干凈的離心管,進(jìn)行洗提。用20ml 99/1 二氯甲烷/甲酸(2*10ml)洗提。將洗提液在60℃蒸干。
注意:樣品提取液過柱的速度大約為2ml/分鐘。
分析方法:
Aglient 1100 系列HPLC
Agilent C18 5µm 4.6×150mm
50+50+1 水+乙腈+乙酸溶液 等強(qiáng)度,0.6ml/min
加樣體積:50µl
熒光檢測器:
激發(fā)波長:330nm 發(fā)射波長:460nm
性能指標(biāo):
對(duì)玉米,小麥,大麥和稻谷的回收率為:>80%
定量檢測限:0.3µg/kg
|
研磨,稱取25g樣品 |
|
加12.5ml 0.1M H3PO4,125ml 二氯甲烷, 混勻 |
|
過濾上清液,加5ml樣品重力過柱; |
|
用5ml正己烷,15ml二氯甲烷清洗柱子 |
|
用20ml 99/1 二氯甲烷/甲酸(2*10ml)洗提 |
|
60℃吹干 |
|
用流動(dòng)相500µl溶解 |
|
注射入儀器 |
|
化學(xué)試劑 ●H3PO4 ●二氯甲烷 ●蒸餾水 ●冰乙酸 ●乙腈HPLC級(jí) 試劑和緩沖液的準(zhǔn)備 ●流動(dòng)相:將50ml乙腈,50ml蒸餾水或去離子水,1ml乙酸混合,調(diào)整至室溫。
|