脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol，DON)又稱嘔吐毒素(vomitoxin)，主要是由鐮刀菌的某些種產(chǎn)生的化學(xué) 結(jié)構(gòu)和生物活性 相似的有毒代謝產(chǎn)物——單端孢霉烯族化合物中的一種。DON 的主要產(chǎn)生菌是禾谷鐮刀菌(Fusariumgraminearum)，據(jù)報(bào)道也有其它一些鐮刀菌可產(chǎn)生 。DON于1972年由日本的Morooka等*分離，同年，Yoshizawa等闡明了這種新的真菌毒素的結(jié)構(gòu)，并將其命名為4- deoxynivalenol(DON) 。DON廣泛存在于，主要污染小麥、大麥、玉米等谷類作物，也污染糧食制品，人和動(dòng)物在誤食被該毒素污染的糧谷類后可以產(chǎn)生廣泛的毒性效應(yīng)。另外，它 還常與其它的霉鹵毒素共同污染農(nóng)作物，進(jìn)入人體后可以相互影響。近年來發(fā)現(xiàn)DON可能與人類食管癌、IgA有關(guān)，對(duì)人類及動(dòng)物的健康構(gòu)成 威脅。DON屬于劇毒或中等毒物，研究表明，DON在體內(nèi)可能有一定的蓄積，但無特殊的靶器官，具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性。人畜攝入了被DON污染的食物/飼料 后，會(huì)導(dǎo)致厭食、嘔吐、腹瀉、發(fā)燒、站立不穩(wěn)、反應(yīng)遲鈍等急性中毒癥狀，嚴(yán)重時(shí)損害造血系統(tǒng)造成死亡，但不同的動(dòng)物對(duì)DON的敏感程度不一，豬是敏感的 動(dòng)物。研究表明，DON可能對(duì)免疫系統(tǒng)有影響，有明顯胚胎毒性和一定致畸作用，可能有遺傳毒性，但無致癌、致突變作用。由于DON的危害嚴(yán)重，引起了各國(guó) 的普遍重視。谷物及飼料中DON的含量有嚴(yán)格的*。我國(guó)谷物中DON 的*為1.0 mg/kg 。
【小麥嘔吐毒素檢測(cè)試紙條檢測(cè)前準(zhǔn)備】
1. 將待用嘔吐毒素?zé)晒舛靠焖贆z測(cè)試紙條、樣品提取液、樣品稀釋液恢復(fù)至室溫;
2. 將試紙條恒溫孵育器開機(jī)，待溫度升至 37℃后即可使用;
3. 將熒光讀數(shù)儀開機(jī)，預(yù)熱 10min，插入本批次產(chǎn)品所對(duì)應(yīng)的 ID 卡(每批次產(chǎn)品只需插一次即可)，如需切換
檢測(cè)項(xiàng)目，掃描相應(yīng)項(xiàng)目和批次的條形碼即可。
測(cè)試步驟
1. 取有代表性的樣品 300-500g，粉碎機(jī)粉碎(細(xì)度為 90%顆粒物可通過 20 目篩)，對(duì)粉碎后的樣品再次混勻并進(jìn)行二次取樣;
2. 準(zhǔn)確稱取 5.0±0.05g 粉碎后的樣品于 50mL 離心管中，加入 25mL 樣品提取液(1:5 提取)，振蕩提取 5min;
(①待測(cè)樣品稱取量與提取液加入量可以同比例放大進(jìn)行提取;②當(dāng)待測(cè)樣品吸水量過大不易提取時(shí)，可采用 1:10 比例提取，檢測(cè)結(jié)果乘以 2 即為樣品嘔吐毒素的殘留濃度)
3. 提取結(jié)束后，4000rpm 離心 2min(如未配置離心機(jī)，可靜置 3-5min 待分層明顯)，取 100μL 上清液，加入到 1000μL 樣品稀釋液中，混勻備用。
4、拆開包裝袋，取出檢測(cè)試紙條，打開包裝后請(qǐng)立即使用;
5、用移液槍吸取稀釋后的待測(cè)液 100μL 加到試紙條上的加樣孔中，開始計(jì)時(shí)孵育 8 min(蓋上孵育器蓋);
6、孵育結(jié)束后，將試紙條插入熒光讀數(shù)儀中，按讀數(shù)鍵或者觸摸屏幕讀數(shù)即可;
小麥嘔吐毒素檢測(cè)試紙條結(jié)果解釋
1. 定量檢測(cè)結(jié)果將呈現(xiàn)于熒光讀數(shù)儀液晶顯示屏上，同時(shí)可按打印鍵打印獲得紙質(zhì)的檢測(cè)報(bào)告;
2. 陰性(-)：檢測(cè)結(jié)果
3. 陽性(+)：檢測(cè)結(jié)果≥cut-off 值(可根據(jù)客戶的內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行調(diào)整);
4. 無效：讀數(shù)儀報(bào)錯(cuò)，則本次檢測(cè)無效，需重新測(cè)試;
5. 如檢測(cè)結(jié)果超出定量范圍的上限，可取離心后的上清液，用樣品提取液稀釋 5 倍后再次檢測(cè)(即先取 100μL離心后的上清液，加 400μL 樣品提取液混勻，再取 100μL 混勻后液體，加入到 1000μL 樣品稀釋液中混勻，后取 100μL 稀釋后的液體加入試紙條的加樣孔中即可)，檢測(cè)結(jié)果乘以 5，即為樣品的終濃度。
