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ApoTome熒光影像雜光消除系統(tǒng)
有效消除較厚熒光樣本非焦面雜光，使影像澄清。
可做光學切片，3D重組。
On-line獲得澄清影像。
輕易切換傳統(tǒng)熒光及澄清化熒光擷取兩種模式。
適用于Zeisszui高階正立與倒立顯微鏡。
熒光標定為研究細胞學與分子生物學十分重要及普遍的方法，然而傳統(tǒng)的顯微熒光擷取往往無法克服非焦距面雜光的干擾，導致影像模糊不清而無法獲取精確的信息。此現(xiàn)象尤其發(fā)生于以高倍率高解析力物鏡觀察較厚之熒光樣本時。因高倍率高解析力物鏡之景深較薄，僅約1um，但樣本之厚度往往大于1um，若落于景深范圍外（非焦距面）的熒光樣本所產(chǎn)生之雜光無法消除，不但會干擾焦距面熒光影像的觀察，且進一步地阻礙后續(xù)3D影像重組與3D影像量測的進行
目前較廣為人知的消除非焦距面雜光的方式有兩種：其一為共軛焦顯微鏡，以pinhole的控制阻擋非焦面雜光進入影像擷取系統(tǒng)；其二為3D deconvolution，依點擴散函數(shù)（point spread function）原理，將已擷取之較模糊的熒光影像以軟件運算方式處理，以獲得澄清化的影像。前者效能但十分昂貴，后者效能雖佳，但有軟件運算費時甚久，無法及時獲得影像之缺點。
?ApoTome為Zeiss于2002年底正式推出之熒光影像非焦面?”Apo”為*之光學，”Tome”為切片之意，ApoTome”
即意指*之光學切片。
?此系統(tǒng)結合特殊硬件裝置與軟件運算的方式，達到實時的澄清化熒光影像擷取。
?硬件方面包括一內(nèi)含光柵之滑板及其控制器，軟件則包含硬體的操控界面與擷取影像的運算程序。
使用時將此光柵滑板推入熒光光路中視野光圈的位置，使光柵正確投影于樣本的焦距面，再以控制器控制三段光柵位置，以數(shù)字影像系統(tǒng)擷取三段光柵位置投影之影像后，立即經(jīng)軟件的運算獲得消除非焦距面雜光之澄清化影像，光學切片厚度可達1 Airy，有助于后續(xù)3D影像重組與3D影像量測實驗的進行。
ApoTome可裝置于Zeiss*正立熒光顯微鏡Axio Imager D2、Z2及倒立熒光顯微鏡Axio Observer D1、Z1，方便現(xiàn)有之Zeiss顯微鏡升級。可使用傳統(tǒng)熒光光源（汞燈或氙燈），不需使用昂貴的雷射燈管，研究者可以的成本獲得消除熒光影像非焦面雜光的功能。另由于軟件運算時間大大地減少（130萬畫素僅需約100ms），且不必要擷取Z軸堆棧影像即可做澄清化的運算處理，研究者得以迅速判斷所擷取影像的樣本優(yōu)劣，并迅速從中獲得更精確的信息，大為提升研究的效率。應用領域廣及細胞生物學、神經(jīng)學、發(fā)育生物學、分子病理學、分子遺傳學等。相關之熒光標定實驗方法如蛋白質(zhì)免疫熒光標定，染色體熒光原位雜交，自發(fā)性熒光蛋白質(zhì)標定等研究，皆可應用ApoTome而獲得澄清化的熒光影像擷取與更精確的判讀。
